大家好,小苏来为大家解答以上问题。引物长度一般多长,引物长度很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、引物是指核苷酸聚合开始时受刺激合成的具有特定核苷酸序列的大分子,与反应物共价连接。这种分子称为引物。
2、引物通常是两个合成的寡核苷酸序列。一条引物与靶区一端的一条DNA模板链互补,另一条引物与靶区另一端的另一条DNA模板链互补。
3、所有的DNA复制都是从一个固定的起点开始的,所有已知的DNA聚合酶都只能延伸DNA链,而不能从头合成DNA链。在DNA复制中,RNA聚合酶通常在DNA模板上合成一段RNA引物,然后DNA聚合酶从RNA引物的3’端合成一条新的DNA链。
4、作用机制:引物是两个合成的寡核苷酸序列。一条引物与靶基因一端的一条DNA模板链互补,另一条引物与靶基因另一端的另一条DNA模板链互补。
5、在PCR(聚合酶链式反应)技术中,目标基因的核苷酸序列是已知的。根据该序列,合成引物。通过使用PCR扩增技术,目标基因的DNA在受热变性后被熔化成单链。引物与单链相应的互补序列结合,然后在DNA聚合酶的作用下延伸。重复这个循环,延伸的产物也可以与引物结合。
6、扩展数据
7、引物设计有三个基本原则:首先,引物和模板的序列要紧密互补;其次,引物与引物之间应避免稳定的二聚体或发夹结构;第三,引物不应在模板的非靶位点引发DNA聚合反应(即错配)。
8、为了实现这三个基本原则,应该考虑许多因素,例如引物长度,产物长度、序列Tm值(解链温度)以及双链引物和模板的内部稳定性(由G值反映)。
9、引物二聚体和发夹结构的能量值、假引发位点的引发效率、引物和产物的GC组成等。如有必要,应对引物进行修饰,如添加限制性内切酶位点和引入突变。
10、参考来源:搜狗百科-入门
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